ScienCel內皮細胞培養基-無谷氨酰胺1001-NG
英文名:Endothelial Cell Medium – No Glutamine
貨號 1001-NG
產地 美國
縮寫 ECM-NG
規格 500 ml
用途 科研
包裝 瓶裝
保存 4℃冰箱
價格:¥2178.00
產品名稱:ScienCel內皮細胞培養基-無谷氨酰胺1001-NG
dothelial cell medium – no glutamine (ECM-NG), when used with Endothelial Cell Growth Supplement (ECGS) and FBS is a complete medium designed for optimal growth of normal endothelial cells in vitro. It is a sterile, liquid medium which contains essential and non-essential amino acids, vitamins, organic and inorganic compounds, hormones, growth factors, trace minerals and a low concentration of fetal bovine serum (5%). The medium is HEPES and bicarbonate buffered and has a pH of 7.4 when equilibrated in an incubator with an atmosphere of 5% CO2/95% air. The medium is formulated (quantitatively and qualitatively) to provide an optimally balanced nutritional environment that selectively supports the growth of normal endothelial cells in vitro.
ECM-NG does not contain L-glutamine, an essential amino acid that is unstable in solution at 37°C. ECM-NG should be supplemented with L-glutamine (L-Glu; cat #0813)or stable L-glutamine dipeptide, L-alanyl-l-glutamine (LALG, Cat. #0733). The recommended LALG concentration ranges from 2mM to 10mM but may vary with culture conditions.
ECM-NG consists of 500 ml of basal medium, 25 ml of fetal bovine serum (FBS, Cat. #0025),5 ml of Endothelial Cell Growth Supplement (ECGS,Cat. #1052 and 5 ml of penicillin/streptomycin solution (P/S, Cat. #0503). Note: FBS, ECGS and P/S are not pre-mixed in ECM-NG; they must be added separately to make the complete ECM-NG.
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常見問題問答:
一、血清或培養基產生了顏色或沉淀的問題:
問:我用的是四季青的胎牛血清,56℃30分鐘滅活后出現了白色少量絮狀沉淀,是不是污染?還能不能 再用?血清的生產日期是2006年7月(現在是2007年6月11日)。
答:應該問題不大。你可以取少量血清放入培養皿中,37℃過夜培養看看就知道是否污染了。血清中沉淀 物的出現有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。
二、懸浮細胞培養時能否加血清?如果加了會有什么結果?為什么懸浮細胞培養時就不能加血清?
答:血清是細胞培養基中重要的培養成份之一,對細胞生長有廣泛影響。在細胞培養時,我們通常會加入 10%的血清。血清的質量對細胞培養的成功至關重要。一般說來,牛血清包括以下成分:生長因子(如激素,白細胞介 素等),他們可以促進細胞生長;貼附因子,他們可以促進細胞的貼壁,往往只有細胞貼壁才能增值(懸浮培養的細胞 除外);蛋白質(如血清白蛋白,球蛋白等),既可以作為營養物質,又可以中止胰酶的作用;還有很多成分不明的物 質。血清還可以起到解毒作用,如脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性。血清還可以是細胞免受機械損傷。因此,無 論是貼壁細胞還是懸浮細胞,血清是*的。除非因實驗要求無血清培養時,例如:為使細胞同步化時,我們會 采用無血清培養的。單純的說懸浮細胞培養不能加血清就沒有太多的道理了。
三、血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理:
答:血清中沉淀物的出現有許多種原因,但普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培 養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
四、如何避免沉淀物的產生?
答:我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作 :
(1)解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃ 至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
(2)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
(3)請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會 因此受到損害,而影響血清的質量。
(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
(5)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30 分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖 晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
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